相衬显微镜
- 这是一种光学显微镜,在光穿透到未染色的样品期间会发生小小的光偏差,即相移。这些相移会转换为图像,意味着当光线通过不透明的样品时,相移会使样品变亮,从而在背景中形成照明(明亮)的图像。
- 当使用透明标本时,相衬显微镜会产生高对比度的图像,因此微生物培养物,薄组织碎片,细胞组织和亚细胞颗粒的图像更是如此。
- 相衬显微镜工作背后的原理是使用光学方法将标本转换为振幅图像,该图像由显微镜的目镜观察。
- PCM可用于查看未染色的细胞(也称为相对象),这意味着可以维持细胞的形态,并且可以以自然状态,高对比度和有效清晰度观察细胞。这是因为,如果标本被染色并固定,它们会杀死大多数细胞,而明场光学显微镜却无法消除这种特征。
- 在光穿透过程中发生的偏移会转换为幅度变化,从而引起图像对比度。
- 结合增强对比度的元素(例如荧光),它们可以更好地呈现标本图像。
相衬显微镜的零件
相衬显微镜的仪器基于从接收光源到图像可视化的光路。
因此,其顺序组成为:
- 光源(水银弧光灯)
- 集体镜头
- 光圈
- 冷凝器
- 环形冷凝器
- 标本
- 目的
- 相板
- 偏光
- 相环
相衬显微镜的功能
- 由偏离的散射(偏转)光和到达被吸收的样品的不偏离光引起的变化在一定波长处产生并产生颜色。由散射光和吸收光产生的差异称为振幅变化。这些幅度变化很敏感,因此无法通过相差显微镜之类的照相设备进行可视化,因此人眼即可看到。
- 相衬显微镜的聚光镜有一个不透明的圆盘,称为圆环,而透明的圆环会产生一个穿过样品的光锥。由于光的变化,由于光密度的变化而导致样品上的一些光弯曲,从而在物镜上形成图像。无偏离的光将撞击相板上的相环,而偏离的光将错过直接通过相板的相环,从而形成图像。
相差显微镜设计有物镜,当与对比度增强技术(例如荧光)结合使用时,物镜可以执行多种功能。物镜位于内部相板中,其光吸收和相位移(即未衍射)会发生变化,从而形成了一个宽广的光谱以对比样品并在背景中形成强烈的对比度。
相衬显微镜的应用
- 确定活细胞的形态,例如动植物细胞
- 研究微生物的运动能力和运动结构
- 检测某些微生物元素,例如细菌内生孢子
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